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叶绿素的提取与分离实验
2015-07-07 09:14:51来源:元素商城

元素百科资讯频道:叶绿体色素又称光合色素,在高等植物中可分为叶绿素和类胡萝卜素两大类,前者包括叶绿素 a(蓝绿色)和叶绿素 b(黄绿色),后者包括胡萝卜素(橙色)和叶黄素(黄色),它 与 们 类囊体膜上的蛋白质结合形成色素蛋白复合体, 不溶于水, 易溶于酯, 因此可用丙酮、乙醇、石油醚等有机溶剂进行提取。下面是关于叶绿素的提取与分离实验。

叶绿体色素的提取与分离

材料与设备试剂:

1、材料 新鲜的菠菜或小白菜等其他绿色植物叶片。  

2、设备 电子天平、研钵、烧杯、量筒、培养皿、刻度试管、试管夹、试管架、酒精灯、剪刀、圆形滤纸、小漏斗等。 

3、试剂 丙酮、四氯化碳、无水硫酸钠、6mol/L 盐酸、醋酸铜粉末、碳酸钙等。

一、叶绿体色素的提取 

1. 取菠菜或其他植物新鲜叶片5g,洗净,擦干,去掉主脉后剪碎,放入研钵中。2.在研钵中加入少量碳酸钙和约 3-5mL 丙酮后,研磨 成匀浆,研磨过程中根据情况加入一定量的丙酮以利于研磨,匀浆用多层纱布过滤到试管中。3. 在残渣中再加入3~5mL 丙酮,研磨过滤,共得深 绿色溶液近10mL,其中含有叶绿素 a、叶绿素 b、叶黄素、胡萝卜素等色素及其它脂溶性物质。

二、叶绿体色素的分离 

1. 纸层析分离法  具体操作为:1.先用条滤纸(2cm×4cm)沿长度方向卷成一个紧实的纸芯。取一张圆形层析滤纸(直径,略大于培养皿直径),在其中心位置钻一个纸芯粗度的圆形小孔(滤纸不能折叠),将卷好的纸芯一端插入孔内少许,并剪去纸芯上端多余部分,使纸芯上端与滤纸恰好平齐,下端长约 1.5cm(与 培养皿盖高度同)。

2.把个这带纸芯的圆形滤纸,平放在干净的培养皿上,用细玻璃滴管吸取少量叶绿体色素的丙酮提取液,小心地滴入纸芯上端7~10 滴。注意:一定要在色素斑点稍风干后,再滴入另一滴,而且液滴不能污染滤纸。3.向培养皿中倒入适量(约为培养皿高度的1/3 左右)四氯化碳,并加入一勺(适量)的无水硫酸钠,使纸芯下端浸入其中,并立即盖上培养皿。 此时, 推动剂借毛细管引力顺纸芯扩散至圆形滤纸上,并把叶绿体色素向四周推动,数分钟后,就可见到滤纸上出现四或五个颜色不同的同心环,并逐渐扩大。4.当推动剂前沿接近滤纸边缘时(约30min左右),取出 滤纸,即可看到分离的各种色素,用 笔 铅 标出各种色素的位置和名称,并绘简图示之或拍摄图片。 

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