化工资讯
当前位置:元素商城  >  化工资讯网  >   化工热点资讯   >  细胞爬片的操作方法以及技巧
细胞爬片的操作方法以及技巧
2019-05-28 09:19:32来源:元素商城

在医学生物研究中,免疫荧光检测等需用到细胞爬片。现有的细胞爬片多采用表面平整、光滑的透明玻璃玻片。但在做免疫荧光检测时,为了节约抗体,需免疫组化笔在爬片上进行范围的圈定,将抗体加入划定区域,免疫组化笔中的疏水成分阻滞抗体溢出所圈定的范围,从而达到节约抗体的目的。细胞爬片是细胞培养中比较经常会用到的,现将自己操作的一些方法与技巧拿与大家分享

 细胞爬片.jpg

细胞爬片的特点

1.玻片表面经过TC处理,双面均可使用。

2.γ射线灭菌,保证无菌。

3.使用便捷,只需打开包装,将爬片放入孔板内,将细胞悬液滴到爬片上即可培养。

4.爬片厚度为0.17mm,直径为8mm/14mm/20mm/25mm.分别适用于48孔细胞培养板/24孔细胞培养板/12孔细胞培养板/6孔细胞培养板。

5.超强吸附:该玻片表面具有永久的阳离子电荷,可以通过静电作用吸附冰冻切片组织或细胞,使之粘附在玻片上,进而在玻璃和切片组织之间形成共价键.因此,无需粘黏剂或者蛋白包被,该玻片也能牢固的粘附切片或细胞。

 

爬片的准备

1、爬片可用一般的盖玻片,也可用专用爬片;

2、应用盖玻片,可根据自己的需要剪裁成合适的大小,以备置于6孔板、12孔板或24孔板;

3、将剪裁好的爬片,置于浓硫酸中浸泡并过夜,第二天先用自来水冲洗20遍,再用三蒸水冲洗3遍(个人认为主要目的是冲洗干净就可以了),放在饭盒或者培养皿(一定是玻璃的哦,要不然就……)中烘干后进行高压消毒。

 

培养板的准备

1、泡酸过夜

2、冲洗,烘干(12步骤与前大致相同)

3、放入超净工作台用紫外线照12小时就可以用了(在照之前可以将爬片一并放入,若细胞贴壁能力不强,可经多聚赖氨酸浸片后放入。贴壁能力强的话,就可以省略了,进行紫外线消毒)

注:此步自己的经验是爬片可以先浸入消毒后的PBS内,紧接着放入培养板内。目的:浸过PBS的爬片依靠表面的液体,可以用培养板孔底贴和紧密,以利于细胞长到爬片上。(自己刚开始做的时候,经常就是细胞全都长在了爬片与培养板之间,爬片上细胞罕见。)

 

细胞爬片

1、胰酶消化细胞后计数

2、根据自己的需要选择合适的细胞密度种入培养板内即可

3、第二天即可进行干预措施

您可能感兴趣的中国化工网栏目: 化学试剂化学元素化学元素周期表CAS查询
元素商城微信公众号
「一个有逼格的公众号」
相关标签: 细胞微生物  
相关专题: 细胞
相关阅读:
●  维生素b2作用机理是什么,含维生素b2最多的食物是哪些
元素百科为您介绍维生素b2作用机理以及含维生素b2最多的食物。维生素b2在我们生活中还是比较常见的,维生素b2又叫核黄素,它是许多动物和微生物生长过程中必不可少的因素。那么你知道它究竟有何用处吗? 维生素b2的作用机理维生素B2的主要生理功用是作为辅酶促进代谢。核黄素和磷酸及一分子蛋白质结合成为黄素酶。这一类酶又叫脱氢酶,重要的是要非常介导的氢原子转移对糖、脂和氨基酸的代谢都很重要。它是......
●  墨西哥洞穴盲眼鱼启发治疗糖尿病新思路
元素百科为您介绍墨西哥洞穴盲眼鱼启发治疗糖尿病新思路。连续数月,生活在墨西哥黑暗洞穴中的一种鱼都没有食物。在更长的时间里——数千年来,它们甚至没有光,因此在进化过程中,它们的眼睛退化,失去了皮肤色素。 研究人员发现这种奇怪的生物还有一种怪癖。为了在食物稀少的环境中生存下来,它们进化出了将营养转化为能量的极端方式。这些特征形成了诸如血糖大幅波动的状况,在人类中,这是Ⅱ型糖尿病的前兆。但在这......
●  日本发现流感病毒新特性 或有助开发新型抗病药
元素百科为您介绍日本发现流感病毒新特性或有助开发新型抗病药。据日媒报道,日本东京大学和京都大学的研究小组近日在英国科学杂志上发表研究结果称,流感病毒在部分遗传基因不足时会从已感染的细胞获取不足的基因并增殖。 据该小组的东大教授河冈义裕称:“如果详细知晓病毒的增殖机制,也将有助于开发新型抗流感药物。” 报道称,流感病毒的遗传基因由8条核糖核酸(RNA)构成,增殖时将RNA列于固定位置并产生......

您确定要从购物车中移除吗???