化学词典告诉你免疫印迹的优点以及工作原理。免疫印迹(immunoblotting)又称蛋白质印迹(Western blotting),是根据抗原抗体的特异性结合检测复杂样品中的某种蛋白的方法。
免疫印迹的优点
1、 湿的固定化基质膜柔韧, 易于操作;
2 、固定化的生物大分子可均一的与各种免疫探针接近, 不会象凝胶那样受孔径阻隔;
3、 免疫印迹分析只需少量试剂;
4、 孵育、洗涤的时间明显减短;
5、可同时制作多个拷贝, 用于多种分析和鉴定;
6、结果以图谱形式可长期保存;
7、 免疫探针可通过降低PH值等方法, 象抹去录音磁带一样将探针抹掉, 再换用第二探针进行分析检测。免疫印迹法的应用范围及优点不仅局限于此, 它必将随着这一方法的深入研究而不断发展和完善。
免疫印迹法的工作原理
将混合抗原样品在凝胶板上进行单向或双向电泳分离, 然后取固定化基质膜与凝胶相贴。在印迹纸的自然吸附力、电场力或其它外力作用下, 使凝胶中的单一抗原组份转移到印迹纸上, 并且固相化。最后应用免疫覆盖液技术如免疫同位素探针或免疫酶探针等, 对抗原固定化基质膜进行检测和分析。