化工资讯
当前位置:元素商城  >  化工资讯网  >   化工热点资讯   >  离子交换层析的原理及注意事项
离子交换层析的原理及注意事项
2017-04-20 09:21:35来源:元素商城

化学词典告诉你离子交换层析的原理及注意事项。离子交换层析是以离子交换剂为固定相,依据流动相中的组分离子与交换剂上的平衡离子进行可逆交换时的结合力大小的差别而进行分离的一种层析方法。

 离子交换层析的原理及注意事项.jpeg

离子交换层析的原理

离子交换层析是根据蛋白质所带电荷的差异进行分离纯化的一种方法。蛋白质的带电性是由蛋白质多肽中带电氨基酸决定的。由于蛋白质中氨基酸的电性又取决于介质中的pH,所以蛋白质的带电性也就依赖于介质的pH。当pH较低时,负电基团被中和,而正电基团就很多; 在pH较高时,蛋白质的电性与低pH时相反。当蛋白质所处的pH,使蛋白质的正负电荷相等,此时的pH称为等电点。离子交换层析所用的交换剂是经酯化、氧化等化学反应引入阳性或阴性离子基团制成的,可与带相反电荷的蛋白质进行交换吸附。带有阳离子基团的交换剂可置换吸附带负电荷的物质,称为阴离子交换剂,如DEAE-纤维素树脂;反之称为阳离子交换剂,如CM-纤维素树脂。不同的蛋白质有不同的等电点,在一定的条件下解离后所带的电荷种类和电荷量都不同,因而可与不同的离子交换剂以不同的亲和力相互交换吸附。当缓冲液中的离子基团与结合在离子交换剂上的蛋白质相竞争时,亲和力小的蛋白质分子首先被解吸附而洗脱,而亲和力大的蛋白质则后被解吸附和洗脱。因此,可通过增加缓冲液的离子强度和/或改变酸碱度,便可改变蛋白质的吸附状况,使不同亲和力的蛋白质得以分离。

离子交换层析的注意事项

(1)层析柱  离子交换层析要根据分离的样品量选择合适的层析柱,离子交换用的层析柱一般粗而短,不宜过长。直径和柱长比一般为1:10到1:50之间,层析柱安装要垂直。装柱时要均匀平整,不能有气泡。

(2)平衡缓冲液 

离子交换层析的基本反应过程就是离子交换填料平衡离子与待分离物质、缓冲液中离子间的交换,所以在离子交换层析中平衡缓冲液和洗脱缓冲液的离子强度和pH 的选择对于分离效果有很大的影响。平衡缓冲液是指装柱后及上样后用于平衡离子交换柱的缓冲液。平衡缓冲液的离子强度和pH 的选择首先要保证各个待分离物质如蛋白质的稳定。其次是要使各个待分离物质与离子交换填料有适当的结合,并尽量使待分离样品和杂质与离子交换填料的结合有较大的差别。一般是使待分离样品与离子交换填料有较稳定的结合。而尽量使杂质不与离子交换填料结合或结合不稳定。在一些情况下(如污水处理)可以使杂质与离子交换填料有牢固的结合,而样品与离子交换填料结合不稳定,也可以达到分离的目的。另外注意平衡缓冲液中不能有与离子交换填料结合力强的离子,否则会大大降低交换容量,影响分离效果。选择合适的平衡缓冲液,直接就可以去除大量的杂质。并使得后面的洗脱有很好的效果。如果平衡缓冲液选择不合适,可能会对后面的洗脱带来困难,无法得到好的分离效果。

您可能感兴趣的中国化工网栏目: 化学试剂化学元素化学元素周期表CAS查询
元素商城微信公众号
「一个有逼格的公众号」
相关标签: 原料化工中间体  
相关专题: 化学试剂
相关阅读:
●  氯化苦是什么,如何储存
化学词典为您介绍氯化苦是什么以及它的储存方法。氯化苦是一种有警戒性的薰蒸剂,可以杀虫、杀菌、杀鼠,也可用于粮食害虫薰蒸,还可用于木材防腐、房层、船舶消毒,土壤、植物种子消毒等。 氯化苦是什么氯化苦是一种无色或微黄色油状液体,它的的分子式是 CCl3NO2 ,分子量是164.39 ;硝基三氯甲烷,它不溶于水,溶于乙醇、苯等多数有机溶剂。是一种有警戒性的薰蒸剂,可以杀虫、杀菌、杀鼠,也可用于......
●  芳香烃的制备来源及方法
化学词典告诉你芳香烃的制备来源以及方法。芳香烃,通常指分子中含有苯环结构的碳氢化合物。是闭链类的一种。具有苯环基本结构,历史上早期发现的这类化合物多有芳香味道,所以称这些烃类物质为芳香烃,后来发现的不具有芳香味道的烃类也都统一沿用这种叫法。 芳香烃的制备来源煤和石油是制备一些简单芳香烃如苯、甲苯等的原料。而这些简单芳香烃又是制备其它高级芳香族化合物的基本原料。当煤在无氧条件下加热至100......
●  美国研究团队研发新装置:二氧化碳巧变“能源”为电池充电
元素百科为您介绍美国研究团队研发新装置,二氧化碳巧变“能源”为电池充电。蓝天与灰天的对比说明燃烧化石能源对环境的不利影响,而两者之间二氧化碳(CO2)浓度的巨大差异提供了一种尚未开发的发电能源。近日,美国宾夕法尼亚州立大学的团队研制出一种装置,利用化石燃料发电厂排放的二氧化碳与环境空气中二氧化碳的浓度差发电,可给电池充电。 “流动单元”装置工作原理该装置叫“流动单元”,工作原理是将二氧化......

您确定要从购物车中移除吗???