化工资讯
当前位置:元素商城  >  化工资讯网  >   化工热点资讯   >  酵母人工染色体定义及工作原理
酵母人工染色体定义及工作原理
2017-03-14 09:03:29来源:元素商城

化学词典告诉你酵母人工染色体定义及工作原理。近日国际顶级学术期刊《科学》以封面的形式同时刊发了中国科学家的4篇研究长文!由天津大学、清华大学和华大基因分别完成的这4篇长文,介绍了生物合成研究的最新突破:完成了4条真核生物酿酒酵母染色体的从头设计与化学合成——要知道,酿酒酵母总共有16条染色体,此前国际同行奋斗多年才发现了1条。

 酵母人工染色体定义及工作原理.jpeg

酵母人工染色体定义

酵母人工染色体(Yeast artificial chromosomes 简称YAC),是一种能够克隆长达400Kb的DNA片段的载体,含有酵母细胞中必需的端粒、着丝点和复制起始序列。是细胞内具有遗传性质的物体,易被碱性染料染成深色,所以叫染色体(染色质);其本质是脱氧核苷酸,是细胞核内由核蛋白组成、能用碱性染料染色、有结构的线状体,是遗传物质基因的载体。

酵母人工染色体工作原理

YAC 载体主要是用来构建大片段 DNA 文库,特别用来构建高等真核生物的基因组文库,并不用作常规的基因克隆。图3-26是 pYAC4 的遗传结构图,当用BamHⅠ切割成线状后,就形成了一个微型酵母染色体,包含染色体复制的必要顺式元件,如自主复制序列、着丝粒和位于两端的端粒。这些元件在酵母菌中可以驱动染色体的复制和分配,从而决定这个微型染色体可以携带酵母染色体大小的 DNA 片段。图3-27描绘了YAC载体的原理性工作流程。对于BamHⅠ切割后形成的微型酵母染色体,当用EcoRⅠ或SmaⅠ切割抑制基因sup4 内部的位点后形成染色体的两条臂,与外源大片段 DNA 在该切点相连就形成一个大型人工酵母染色体,通过转化进入到酵母菌后可象染色体一样复制,并随细胞分裂分配到子细胞中去,达到克隆大片段DNA 的目的。装载了外源DNA片段的重组子导致抑制基因sup4插入失活,从而形成红色菌落;而载体自身连接后转入到酵母细胞后形成白色菌落。这些红色的装载了不同外源DNA 片段的重组酵母菌菌落的群体就构成了 YAC 文库。YAC文库装载的 DNA 片段的大小一般可达200-500kb,有的可达1Mb以上,甚至达到2Mb 。

YAC载体功能强大,但有一些弊端。这主要表现在3个方面:首先,在 YAC 载体的插入片段会出现缺失(deletion)和基因重排(rearrangement)的现象。其次,容易形成嵌合体。嵌合就是在单个YAC中的插入片段由2个或多个的独立基因组片段连接组成。嵌合克隆约占总克隆的5%~50%。最后,YAC染色体与宿主细胞的染色体大小相近,影响了YAC 载体的广泛应用。YAC 染色体一旦进入酿酒酵母细胞,由于其大小与内源的染色体的大小相近,就很难从中分离出来,不利于进一步分析。但是YAC的一个突出优点是,酵母细胞比大肠杆菌对不稳定的、重复的和极端的DNA 有更强的容忍性。另外,YAC 在功能基因和基因组研究中是一个非常有用的工具。由于高等真核生物的基因大多数是多外显子结构并且有长长的内含子,大型基因组片段可通过YAC 载体转移到动物或动物细胞系中,进行功能研究。

您可能感兴趣的中国化工网栏目: 化学试剂化学元素化学元素周期表CAS查询
元素商城微信公众号
「一个有逼格的公众号」
相关标签: 生物科学生命科学  
相关专题: 酵母人工染色体
相关阅读:
●  糖尿病新疗法——胶囊化胰岛细胞,治糖尿病再也不用打针啦!
元素百科为您介绍:对于患有1型糖尿病的病人来说,他们的免疫系统会攻击胰腺,最终导致病人失去血糖调节能力。这些病人必须经常关注他们的血糖水平,有时一天需要进行几次测量,通过注射胰岛素将血糖控制在健康范围。但是目前很难做到精准的血糖调控,糖尿病病人需要面临长期治疗的难题。许多科学家认为用健康胰岛细胞替换病人胰腺内被损伤的胰岛细胞是一种更好的治疗方法,健康胰岛细胞可以对血糖进行合理调节并释放胰岛素。......
●  诺如病毒的临床表现介绍
元素百科资讯频道:本文主要探讨诺如病毒的临床表现。全球诺如病毒胃肠炎暴发呈明显增加趋势。诺如病毒不同型别之间的重组频繁发生, 诺如病毒感染已成为危害人类健康的重要的公共卫生问题。 本文就诺如病毒的临床表现进行了综述。 潜伏期多在24-48h, 最短12h, 最长72h。感染者发病突然, 主要症状为恶心、呕吐、发热、腹痛和腹泻。 儿童患者呕吐普遍, 成人患者腹泻为多, 24h内腹泻4......
●  细胞核的功能及细胞核移植技术是什么
化学词典告诉你细胞核的功能及细胞核移植技术。什么是细胞核?细胞核(nucleus)是真核细胞内最大、最重要的细胞器,是细胞遗传与代谢的调控中心,是真核细胞区别于原核细胞最显著的标志之一。 细胞核的功能细胞核是细胞的控制中心,一般说真核细胞失去细胞核后,很快就会死亡,但红细胞失去核后还能生活120天;植物筛管细胞,失去核后,能活好几年。1.遗传物质储存和复制的场所。从细胞核的结构可以看出,......

您确定要从购物车中移除吗???