化学词典为你介绍培养液的配制原则及注意事项,培养基是供微生物、植物组织和动物组织生长和维持用的人工配制的养料,一般都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐(包括微量元素)以及维生素和水等。
培养液的配制
1.液体培养基配制
(1)称量一般可用1/100粗天平称量配制培养基所需的各种药品。先按培养基配方计算各成分的用量,然后进行准确称量。
(2)溶化 将称好的药品置于一烧杯中,先加入少量水(根据实验需要可用自来水或蒸馏水),用玻棒搅动,加热溶解。
(3)定容 待全部药品溶解后,倒入一量筒中,加水至所需体积。如某种药品用量太少时,可预先配成较浓溶液,然后按比例吸取一定体积溶液,加入至培养基中。
(4)调pH 一般用pH试纸测定培养基的pH。用剪刀剪出一小段pH试纸,然后用镊子夹取此段pH试纸,在培养基中蘸一下,观看其pH范围,如培养基偏酸或偏碱时,可用1mol/l NaOH或1mol/l HCl溶液进行调节。调节pH时,应逐滴加入NaOH或HCl溶液,防止局部过酸或过碱,破坏培养基中成分。边加边搅拌,并不时用pH试纸测试,直至达到所需pH为止。
(5)过滤 用滤纸或多层纱布过滤培养基。一般无特殊要求时,此步可省去。
2.固体培养基的配制
配制固体培养基时,应将已配好的液体培养基加热煮沸,再将称好的琼脂(1.5%-2%)加入,并用玻棒不断搅拌,以免糊底烧焦。继续加热至琼脂全部融化,最后补足因蒸发而失去水分。
培养液配制注意事项
不同的培养液在配制的时候其成分不同,要注意的事项也不同。
一、配制首先要保证每种成分都是合格的。
1 水的质量很关键,最少是三蒸,电阻率在0.1-1.0×10-6Ω•cm 以上。
2 血清等其它营养成分注意看是否在保质期。
二、配制时各成分最好是分开来配,用之前混好,一周之内用完。
2 最基本的成分配好过滤分装放置4度。
3 血清用之前再按比例加入。
4 抗生素也分装保存,用之前加入。
5 如果配方要求加谷氨酰胺,由于谷氨酰胺在溶液中很不稳定,应置于-20℃冰箱中保存,在使用前加入培养液内。已含谷氨酰胺的培养液在4℃冰箱中储存2周以上时,还应重新加入原来量的谷氨酰胺。
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