元素百科资讯频道   本文主要讲的是采用硫酸二乙酯诱变乳酸菌选育技术的方法介绍，乳酸菌是生产酸奶的主要发酵剂，具有改善胃肠道功能、抗肿瘤提高免疫能力、改善机体营养状况减低胆固醇等特殊的生理功能，是决定酸奶发酵风味品质的关键因素。

本试验以新疆牧民自制酸奶疙瘩中筛选出的乳酸菌为出发菌株，选用DES对菌株进行诱变，选育在高温条件下产酸较强、在低温条件下产酸甚微的菌株；硫酸二乙酯单独用于乳酸菌诱变的报道并不多见，试验所获得的技术和工艺参数为乳酸菌选育技术的应用提供了理论和实际依据，具有很好地实际应用价值。

1材料与方法

1.1材料与仪器设备

乳杆菌(Lactobacillus)LN1#。

培养基与溶液：脱脂乳培养基；MRS培养基；pH值为7.0的磷酸缓冲液；生理盐水；DES溶液（1mLDES溶解于10mL无水乙醇中）。

仪器设备：UV-2102PC型紫外可见分光光度计；Delta320pH计；5804R离心机；LFRA质构仪；垂直净化工作台；HPS-160生化培养箱；DHP-9002恒温培养箱。

1.2方法

1.2.1菌种活化及生长曲线的测定

取菌种LN1#按3%接种于脱脂乳培养基中，42℃恒温培养12h。然后反复传代直至达到要求的活力；对菌种进行单因素实验，分别测定其最适生长温度、最适接种量、最适初始pH值。于最佳条件下测定菌株的生长曲线。

pH值采用pH211型酸度计测定；酸奶酸度酸度采用吉尔涅尔度表示；乳酸菌活菌数采用高层琼脂法测定；OD值的测量采用紫外可见分光光度计测定，波长为600nm。

1.2.2DES诱变条件的确定

取对数生长期菌液5mL，离心并以PBS（pH值为7.0的磷酸缓冲液）洗涤2次，用磷酸缓冲液稀释到一定浓度，转入10mL离心管中。在36～41℃条件下，加入质量分数为0.5%～1.0%的DES溶液，处理20～30min，按照2.5倍DES溶液体积加入质量分数为25%硫代硫酸钠溶液终止反应。通过改变菌液浓度、DES溶液的体积分数、诱变时间、诱变温度控制致死率。

1.2.3诱变效应的测定

采用对照菌株6032、初始菌株LN1#、突变菌株N01#制作酸奶，于10℃储藏，隔天测定其酸度；酸奶物性指标影响程度分析方法采用以下模式：循环次数为2；测量力为20g；测量速度为9mm/s；测量的深度为9mm；探头型号为TA-4。

2结果

对LN1#进行DES诱变，得到最佳参数：DES质量分数为0.7%，诱变时间为30min，诱变温度为37℃；得到一突变菌株N01#，其37℃贮藏时产乳酸量与出发菌株一样，而在10℃贮藏时，产乳酸量明显减少，突变菌株N01#的遗传稳定性较好,不易回复突变；用N01#发酵酸奶，测定酸奶的物性指标，其结果显示，N01#与LN1#无明显差别；与对照组相比较，N01#发酵的酸奶其后酸化时间延长了3天。

以上就是关于本次试验中乳酸菌选育技术方法的具体介绍，希望能够对大家提供参考依据。