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薄层色谱通用显色法有哪些?各自有哪些优点?
2020-06-12 23:18:15来源:元素商城

薄层色谱法广泛应用物质的鉴别、杂质检验和含量测定,也是有机合成中跟踪反应进程的有效手段。薄层色谱被誉为有机合成的“眼睛”,灵敏度高、形成斑点颜色稳定的显色方法在进行跟踪反应进程中至关重要。

薄层色谱用于检测一般有机化合物的通用方法有紫外照射法、碘蒸气法、荧光试剂法、硫酸溶液显色法。

(1)紫外照射法

紫外照射法的显色原理是待测物质存在紫外吸收,用紫外线照射展开的干燥薄层板,板上的有机物会吸收紫外线,从而在板上出现相应的色点。

优点:这种方法方便操作,且不会破坏样品。

(2)碘蒸气法

碘蒸气法的显色原理是大多数有机物遇碘蒸气能显黄-黄棕色斑点。操作方法为:先在封闭缸内放少许碘结晶,再将薄层板放入密闭缸内,多数有机化合物吸附碘蒸气后显示不同程度的黄褐色(棕色)斑点。然后将薄层板放碘蒸气中 5min( 或喷 5% 碘的氯仿溶液) ,取出后置空气中待过量的碘蒸气全部挥发后,喷 1% 淀粉的水溶液,斑点转成蓝色。

优点:对薄层色谱的定性、定量检测非常直观、准确,通用性强。且不会改变有机化合物的性质,与紫外法结合灵敏度高于该两法单独使用。

(3)荧光试剂法

荧光试剂法的原理是自身无荧光的物质可使荧光试剂发生荧光淬灭形成暗斑。操作方法为:用掺入了少量荧光物质的硅胶制成的板,在 254 nm 紫外灯,整个薄层硅胶板板显黄绿色荧光,被测物质由于吸收了部分照射在此斑点位置的紫外线,而呈现各种颜色。

优点:能够制造荧光背景,可使原来紫外下无荧光物质被鉴别,有荧光物质更明显。

(4)硫酸溶液显色法

硫酸显色的原理是浓硫酸对有机物质的碳化作用 。操作方法:喷洒 5% 的浓硫酸乙醇溶液,或 15% 浓硫酸正丁醇溶液,在空气中干燥 15min,再热至 110 ℃直至出现颜色。

优点:对绝大多数有机物有效,是有机合成反应监测的一种万能显色法。

以上四种通用显色方法,具有灵敏度高、形成的斑点颜色稳定、斑点与背景间的对比度好等优点,受到有机合成工作者的青睐。


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