新型酶标板是酶联免疫反应实验中的重要载体工具,新型酶标板包括板架和板条,板条包括板孔和与板孔配合的活塞。现在常用的基本都是96孔的酶标板,不同厂家做出来的酶标板虽然说在整体上看是差不多的,但是在一些小的细节方面会做的不太一样,比如一些结构等方面,这主要是因为要配合不同酶标仪。
酶标板的种类
类型主要根据酶标仪进行选择。又分可拆和不可拆的,对于不可拆的,就是一整块板上的板条都是连在一起的,那么可拆的就是板子上面的板条是分开的,分出来的板条又有12孔和8孔之分。一般用的较多的是可拆的酶标板,如果你之前买了一些这样的板子,那么完全可以只买些酶标板条就可以了。不同的厂家做出来的酶标板虽然整体看上去是差不多的,但是有些小的细节方面会做的不一样,比如结构等,这主要是因为要配合不同酶标仪使用,因此,当你在选择购买酶标板时还要考虑一下你的酶标仪是什么样子。不过一般都是适配的,只有个别的会有所不同。 因为酶标板的材质一般为聚苯乙烯(PS),而聚苯乙烯的化学稳定性较差,可以被多种有机溶剂(如:芳烃、卤代烃等)溶解,会被强酸强碱腐蚀,不抗油脂,在受到紫外光照射后易变色,所以在使用过程中一定要注意这些。
酶标板的使用方法
1、加样品:将标本稀释液加到包被板内,将需要检测的血清用PBS或生理盐水按照1:20的比例稀释后取10ul加入到酶标板的反应孔内。
2、加对照:加入阴性对照3孔,阳性对照1孔,还有100ul的对照血清。
3、进行温育:将反应板震荡,使样品充分的混匀,置于37℃的温箱或者水浴反应20分钟的时间。
4、洗板:用蒸馏水将洗涤液15ml稀释至300ml的体积。手洗的时候应该将反应板孔内的容物倾出,将洗涤液注满反应孔的位置,然后放置30秒钟后用力甩去,这样的动作重复5次后开始拍干。机洗需要进行5次,每孔注入洗涤液200ul或者可以注满,然后停留30秒钟后吸尽拍干。
5、加酶标工作液:在每孔内加入100ul的酶标工作液,放置到37℃的温箱中,反应20分钟后洗板5次,洗板的操作和上述步骤4是相同的。
6、这是反应的最后一步,就是显色和终止反应:将底物50ul加到反应孔内,37℃条件下避光显色10分钟的时间。在每孔内加入终止液50ul混匀用以终止反应。
酶标板的使用需要在无菌的条件下进行。在酶标板使用之前和之后都要认真的进行消毒和清洗,但是需要注意的是有的酶标板在消毒之前需要认真的阅读说明书,看是否可以进行高温消毒。