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离子交换色谱展开剂的类型、对固定相以及流动相的要求
2018-08-30 10:20:36来源:元素商城

元素百科为您介绍离子交换色谱展开剂的类型、对固定相以及流动相的要求。什么是离子交换色谱?它是指离子交换色谱中的固定相中的一些带电荷的基团, 这些带电基团通过静电相互作用与带相反电荷的离子结合。如果流动相中存在其他带相反电荷的离子,按照质量作用定律,这些离子将与结合在固定相上的反离子进行交换。

 离子交换色谱.jpg

离子交换色谱展开剂的类型

①pH=3.0~8.0的各种离子强度的缓冲溶液,如pH8.0的0.005mol/L磷酸缓冲液或pH3.4的2mol/L氯化钠溶液;

②盐溶液,如0.1~2.0mol/L氯化钠溶液;

③蒸馏水;

④在上述各种展开剂中加入少量有机溶剂如甲醇、四氢呋喃、乙腈等。 

离子交换色谱中对固定相的要求

离子交换树脂分为两大类,即阳离子交换树脂与阴离子交换树脂。离子交换树脂的树脂核是由苯乙烯通过二乙烯基苯链聚合而成。二乙烯基苯在离子交换树脂中所占的重量百分比称为“交联度”。交联度可反映树脂的网眼大小。交联度越大,树脂内的孔洞就越小,大分子物质就不易进入树脂颗粒之内。例如分离氨基酸或小分子肽(二肽或三肽),以8%交联度的树脂为宜;而对分子量较大的肽,则以选用2%~4%交联度较小的树脂为适宜。一般只要不影响分离的完成,以采用交联度较高的树脂比较适宜。因为交联度高,网眼小,组成紧密,性质较稳定,不易破坏,寿命长。但由于网眼小,分子小的离子可进去,分子大的离子进不去,也就是交换不上,因此表现为交换容量小,而选择性强。 

离子交换色谱中对流动相的要求

离子交换色谱展开剂的选择要依据被分离化合物的酸碱性,可用各种类型的缓冲液或盐溶液作为展开剂。选择展开剂的前提是根据被分离化合物是酸还是碱,是阴离子还是阳离子来选择。为了使这些离子型化合物得到较好的分离,点样前必须用水或0.1mol/Llv化钠溶液对薄层板展开一次,即可使离子交换薄层得到再生或活化。

由于水是优良的溶剂并具有电离性,因此大多数用离子交换树脂进行色谱分离时,都是在水溶液中进行的。有时亦采用水/甲醇混合溶剂,因为在水相展开剂中加入少量能与水混溶的有机溶剂可以增加样品组分的溶解度并且改变溶剂的分离选择性,还可以减少某些组分的拖尾现象。缓冲液用来控制展开剂的pH值,如在阳离子交换树脂中,经常采用醋酸、枸橼酸、磷酸缓冲液;在阴离子交换树脂中,则采用氨水、吡啶等缓冲液。另外也可通过加入某些盐类溶液来调节展开剂的离子浓度。

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