化学词典告诉你离子对试剂对色谱柱的影响以及降低离子对试剂对色谱柱的影响的方法。
离子对试剂是在高效液相色谱法中引入了离子色谱方法的一种表现。它主要是作用于样品和固定相之间的一种物质,所以在选择离子对试剂时,要考虑色谱柱的填料和样品的酸碱性。
离子对试剂对色谱柱的影响
离子对试剂吸附在色谱柱填料的活性位点上,难以被冲洗下来,导致柱子的死体积增加,通俗点说就相当于柱子变短了,当然会出现保留时间提前,理论塔板数降低,分离度变差的情况。这个吸附过程是不可逆的,即便冲洗色谱柱再充分,也只是能部分恢复色谱柱的性能,延缓色谱柱报废的时间。
这个情况有点类似低分子肝素,离子色谱检测游离硫酸根,色谱柱每测一次样品,保留时间就提前一次。样品数越多,保留时间提前的越厉害。不过这个是低分子肝素样品吸附在了色谱柱上。
如何降低离子对试剂对色谱柱的损伤
色谱柱保存,要避免的是两点:细菌滋长导致的发霉以及因保存溶剂挥发导致的填料变干。有机相成分有杀菌作用,在保存试剂中含量不能太低;但100%有机相或接近100%有机相,因为挥发性太强也不好。所以80%上下甲醇含量的甲醇水作为保存溶剂是适宜的。当然,无论选什么作为保存试剂,色谱柱两端的Peek堵头是一定要堵上并堵紧的。